中心实验室现有分子生物学实验室、流式细胞仪室、激光共聚焦显微镜室、动物操作室、病理学实验室、细胞培养室、生物样本库、PCR实验室等功能分区,相关功能模块设备介绍如下。
一、分析模块设备
功能作用:
通过对细胞各种形态学参数和生物学特征、细胞生化成分组成及含量、细胞的各种功能、特定分子和离子的生物学变化等进行实时定量分析研究,建立涵盖从细胞到组织水平的各种形态学科研技术和方法,从而更客观地揭示生命活动的规律。
主要仪器:
1. 流式细胞仪:
品牌:BD 型号: FACSCanto II
主要参数:
二激光8色:488nm蓝/633nm红
应用:
(1) 淋巴细胞亚群分析、免疫细胞分析,如树突状细胞,抗原特异性细胞,单核细胞等;
(2) 基因转染,如荧光蛋白GFP/CFP/YFP等检测以及FRET等蛋白间相互作用等研究细胞周期及倍体分析;
(3) 网织血小板及网织红细胞分析;
(4) 白血病免疫分型;
(5) 干细胞及肿瘤干细胞分析,干细胞阶段分化发育,以及分化发育的机制;
(6) 血小板活化、血小板自身抗体检测;
(7) 移植中群体反应性抗体和配型检测;
(8) 各种类型稀有细胞的检测鉴定;
(9) 细胞凋亡、增殖和信号传导;
(10) 可溶性蛋白质高通量测定,可溶性分子的研究,如细胞因子,趋化因子,磷酸化蛋白,凋亡相关蛋白等;
(11) 细胞功能检测,如活化、细胞因子、磷酸化蛋白、膜电位、钙流及pH值等检测。
2. 徕卡SP8激光扫描共聚焦显微镜
品牌:Leica 型号: TCS SP8
主要参数:
(1) 物镜配置
N-SIM模式物镜:100xSR复消色差TIRF物镜
N-STORM模式物镜:100xHP复消色差TIRF物镜
(2) 激光器配置: 405nm、488nm、552nm、638nm激光器
(3) 为倒置型显微镜,可以兼容玻片、共聚焦皿等样品载体
应用:
(1) 不同蛋白的共定位分析
(2) 多通道荧光检测
(3) 细胞结构分析
(4) 动态跟踪机体的精细结构和内源性表达的荧光蛋白
(5) 三维图像重建分析研究
3. 倒置荧光显微镜
品牌:Leica 型号: DMi8
主要参数:
(1) 配备5 X, 10X,20 X, 40 X物镜
(2) 手动同轴调焦,12mm调焦行程
(3) 具备明场、相差、荧光、摄像功能
(4) 具备快速荧光成像功能,进度<50ms,光闸切换<100ms
(5) 电动5档荧光光强调节
(6) 配备LASX软件,支持遥控控制
应用:研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位
4. 全波长酶标仪
品牌:Thermo 型号: Multiskan Sky
主要参数:
(1) 200-1000nm全波长扫描
(2) 可以应付几乎所有的光度测量,包括DNA/RNA/蛋白质分析
(3) 支持终点法、动力学和光谱扫描三种测量方式
(4) 配备uDrop超微量检测板,最小检测体积2ul,同时也配备常规96孔/384孔板
应用:DNA、RNA 和蛋白质定量分析
5. 凝胶成像分析系统
品牌:Protein Simple 型号:Alphalmager HP
主要参数
(1) 用于荧光、可见光成像,具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型,可以通过硬件升级以支持化学发光成像;
(2) 采用科研级别CCD,140万像素,分辨率1360×1024;
(3) 检测动态范围为0 - 3.6 OD;
(4) F1.2、8-48 mm自动变焦镜头;
(5) 标配推拉式紫外透射光源,双波长(302、365 nm)双强度,以适合不同应用;
(6) 标配双侧反射白光光源,比单点式白光光源的光场更加均匀;
(7) 标配折叠式白光发光板(透射白光光源),用完可折放在暗箱内;透射成像面积为21×31cm;
(8) 具有打开暗箱门时的UV自动关闭功能,也可切换为在开门时进入切胶模式切胶;
(9) 拍照完毕后,光源自动关闭,无需人工干预;
(11) 具有紫外反射、蓝光反射、蓝光透射光源;
(12) 支持Movie连拍模式,并支持曝光时间叠加功能;
应用:
(1) 核酸检测:EB,SYBR Gree,Radiant红等染色的核酸胶检测;
(2) 蛋白检测:考马斯蓝,银染,Sypro宝石红染色的蛋白质胶检测;
(3) 印迹膜:Western Blotting,Southern Blotting,Northern Blotting印迹以及双向印迹膜;
(4) 其他:克隆及菌斑计数、细胞培养皿,细胞培养瓶,酶标板,TLC培养板,组织切片,载玻片,显微照片等
6. 化学发光成像系统
品牌:Protein Simple 型号:FluorChem E
主要参数
(1) 支持化学发光、荧光、可见光成像;支持印迹膜、核酸胶,蛋白胶、多孔板、培养皿等样品类型;
(2) CCD物理像素830万;
(3) 有效分辨率为3326×2504;
(4) 硬件级灰度值为16 bit(0~65536级灰阶);
(5) 检测动态范围为0~4.8 OD,检测灵敏度可达低fg级水平
(6) 配备FluorChem E图像捕获软件
应用:
(1) 核酸检测:EB,SYBR Gree,Radiant红等染色的核酸胶检测;
(2) 蛋白检测:考马斯蓝,银染,Sypro宝石红染色的蛋白质胶检测;
(3) 印迹膜:Western Blotting,Southern Blotting,Northern Blotting印迹以及双向印迹膜;
(4) 其他:克隆及菌斑计数、细胞培养皿,细胞培养瓶,酶标板,TLC培养板,组织切片,载玻片,显微照片等
7. 超微量分光光度计
品牌:Implen 型号: N50 touch
主要参数
(1) 上样量最低可达0.3uL。
(2) 固定光程原理:0.67mm和0.07mm
(3) 检测范围:dsDNA: 5-7500 ng/ul。
(4) 可检测易挥发溶剂的样品,以及表面张力大的样品。
应用: 满足对核酸、蛋白、菌液以及其他种类样品的测量
8. 荧光定量PCR检测系统
品牌:杭州博日 型号:FQD-96A
主要参数
(1) 样本容量:96孔板、12×8联管、96×0.2ml单管(底部透明)
(2) 动力学范围:1~1010Copies
(3) 激发光波长:300-800nm
(4) 检测波长:500-800nm
(5) 适用染料:F1: FAM, SYBR GreenⅠ; F2: VIC, HEX, TET, JOE, Cy3, TAMARA; F3: ROX TEXAS-RAD; F4: CY5; F5: CY5.5
(6) 模块工作温度:4~105℃(*小设置温度:0.1℃)
(7) 升降温速率:4.0℃/s (max)
(8) 控温模式:BLOCK、模拟Tube模式(依据加液量自动控制)
(9) 加液量:5~100μL
(10) 梯度温度范围: 1~36℃
(11) 热盖温度范围:30~110℃
(12) 荧光强度检测重复性:5%
(13) 扫描模式:全板扫描,指定行扫描
应用:
(1) 核酸定量分析。
(2) 基因表达差异分析。
(3) SNP 检测。
(4) 甲基化检测
(5) 产前诊断
(6) 病原体检测:
(7) 肿瘤基因检测
二、病理模块设备
功能作用:
通过取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制成病理切片,用显微镜检查病变,探讨疾病发生的原因、发病原理和疾病过程中发生的组织和器官的结构、功能和代谢方面的改变及其规律。
主要仪器:
1. 全自动脱水机
品牌:Leica 型号:TP1020
主要参数:
(1) 可容量80个标本
(2) 可作9个程序编写,能自动操作
(3) 共12个反应缸,含有10试剂反应站及2个石蜡室
(4) 每站点能单独设置
(5) 液晶显示(LCD)的控制面板
(6) 能提供断电情况下的标本保护
应用:用于组织梯度脱水,制备样本
2. 石蜡包埋机
品牌:Leica 型号:HistoCore Arcadia H
主要参数:
(1) 热台:
工作温度:50℃至75℃,以1℃增幅进行调节
可拆卸式托盘:容纳约150个包埋盒
石蜡缸:最多4 L
照明:白色 LED
显示屏:5.7 英寸 LCD 电容触摸屏
(2) 冷台:
工作温度:-6 ℃ (自调节)
保证最低工作负荷量:30 分钟凝固 65 个蜡块
应用:用于制备石蜡切片样本
3. 石蜡切片机:
品牌:Leica 型号:Histocore BIOCUT
主要参数:
(1) 切片厚度
范围: 1 - 60 µm
设置值:1 - 10 µm (1 µm 递增)
10 - 20 µm (2 µm 递增)
20 - 60 µm (5 µm 递增)
(2) 修片厚度:
范围: 10 µm、30 µm
应用:用于石蜡切片
4. 冷冻切片机
品牌:维格斯 型号:C5500
主要参数:
(1) 切片厚度:
0μm~10μm,1μm步进量
10μm~20μm,2μm步进量
20μm~50μm,5μm步进量
50μm~100μm,10μm步进量
(2) 冷冻台温度最低可达:-45℃
(3) 冷冻室温度设定范围:-10~-30℃
应用:用于冷冻切片使用
5. 生物组织摊烤片机
品牌:金华华速 型号:HS-1145
主要参数
(1) 漂片,烘片,拷片三部分温控范围为:室温-90℃
(2) 拷片室可容纳3个30至40片的染色架,也可同时放入2个250ml的烧杯融蜡
应用:对标本进行漂片,烘片,拷片处理
三、样品制备模块设备
主要仪器:
1. 旋转蒸发仪:
品牌:上海亚荣 型号:RE-2000A
主要参数
(1) 旋转瓶容积: 1L, 24#标口
(2) 收集瓶容积: 1L, 35#球磨口
(3) 旋转速度: 0-180rpm
(4) 浴锅控温范围:0-99℃, 控温精度 ±1℃
应用: 用于回收、蒸发有机溶剂,快速液体样品浓缩
2. 半自动固相萃取仪:
品牌:Phenomenex 型号:T12
主要参数
(1) 经典的12管真空固相萃取装置
(2) 标配流量阀,精确控制流速
应用:用于样品的分离,纯化和富集
3. 十万分之一天平
品牌:Sartorius 型号:Quintix65-1CN
主要参数
(1) 称重能力:60g
(2) 可读性:0.01mg
(3) 重复性:0.02mg
(4) 线性:0.1mg
(5) 校准:内部校准
应用:满足实验室精密称量需求
4. 冷冻干燥机:
品牌:Labconco 型号: FreeZone
主要参数:
(1) 容量为4.5L,配备12个歧管接口。
(2) 冷阱温度可达-50℃。可干燥2L溶液/24小时。
(3) 可按键全自动控制致冷和抽真空,也可进行手动实现二者分别控制。
(4) 配备可伸缩排水管与冷阱底部相连,用于排除蒸发后的废液。
(5) 具有自动除霜功能
应用:用于冻干样本(溶剂为水,且不含酸碱)
5. 超纯水机:
品牌:Think-lab 型号: Labonova Direct
主要参数
(1) 供水量:可达1.2 L/min,I类水供水量:可达7 L/h
(2) 25℃时的电导率:0.055μS/cm,25℃时的电阻率:18.2MΩ-cm
(3) TOC:<5 ppb,DNA酶:<5pg/ml,RNA酶:<0.5pg/ml
(4) 细菌:<0.1 cfu/ml,内毒素:<0.001 EU/ml,大于0.2μm的颗粒/ml :<1
应用:同时提供纯水与超纯水,满足实验室各类实验用水需求
6. 超声波细胞破碎仪
品牌:Thermo 型号: 120 WATT
主要参数:
(1) 处理量 0.2 ~ 100 mL
(2) 超载保护
(3) 脉冲模式(1 s 至 59 s)
应用:样品制备
7. 微透析采样设备
品牌:Harvard 型号: Pump 11 Elite
主要参数:
(1) 搭配2.5ml 注射器
(2) 流速在 pl/min至ml/min范围可调
(3) 双通道
应用:微流体;脑内注射;微透析采样
8. 洗板机
品牌:科华 型号: ST-36W
主要参数
(1)板的类型:96孔板(U、V或平底板)
(2) 洗头:8道或12道
(3) 液体容器:2L洗液瓶,2L废液瓶
(4) 吸液模式:常规或清扫
(5) 残液量:<2ul< span="">
应用:酶联反应清洗酶标板
9. 脑立体定位仪
品牌:众实迪创 型号: ZS-FD
主要参数
(1) 三维推进行程:≥80mm,操作臂移动范围上下、左右、前后可达数值≥80mm
(2) 计数精度:±0.1mm, 移动距离读数精度为10μm
(3) 适用于大小鼠
应用:脑立体定位
10.缺氧小室
品牌:StemCell 型号: 27310
主要参数:
(1) 外形尺寸:直径 31 cm;高 11 cm
(2) 内部尺寸:托盘直径:26.7 cm
(3) 容量:35-100 mm培养皿、96 孔板、培养瓶
应用:模拟缺氧环境
四、细胞培养模块设备
功能作用:
主要用于细胞培养及其他分子生物学实验
主要仪器:
1. 生物安全柜
品牌:Haier 型号: HR1200-Ⅱa2
主要参数:
(1) Ⅱ级A2型生物安全柜,30%气体外排,70%气体循环
(2) 双人操作,工作区宽度≥1200mm
(3) 主过滤器:采用超高效过滤器ULPA,工作区洁净度等级10级;
(4) 外排过滤器:采用高效过滤器HEPA,保证排放气流的洁净度优于实验室洁净度要求
(5) 风速:平均送风风速在0.25~0.50m/s;吸入口风速≥0.5m/s;
应用:
(1) 原代细胞分离
(2) 细胞培养相关操作
(3) 其它分子生物学实验相关操作
2. 二氧化碳培养箱
品牌:ESCO 型号: Celmate® CLM-170B-8-NF
主要参数:
(1) 内腔容积170L
(2) 可90℃高温湿热循环灭菌
应用:
(1) 原代细胞培养
(2) 细胞株培养
(3) 干细胞培养
3. 倒置显微镜
品牌:明美 型号: MI52
主要参数:
(1) 目镜:大视野WF10X/22,对中望远镜
(2) 物镜:
无限远长工作距离平场消色差物镜 4X/0.10 工作距离:17.15mm
无限远长工作距离平场消色差物镜 40X/0.60 工作距离:3.5mm
无限远长工作距离平场消色差相衬物镜 10X/0.25 工作距离:4.3mm
无限远长工作距离平场消色差相衬物镜 20X/0.40 工作距离:8.0mm
应用:对活体细胞,透明液态组织进行显微观察,也可对培养皿中的培养组织进行动态显微观察
4. 倒置显微镜
品牌:尼康 型号: TS2
主要参数:
(1) 光学系统:CFI60无限远光学系统,齐焦距离≥60mm;
(2) 透射光照明: 高亮度白色LED照明,60000小时寿命,带“复眼透镜”,使照明均匀;
(3) 目镜筒:铰链式双目镜筒;瞳距:50-75mm,45度水平方向倾角;
(4) 目镜: 10x(视场22mm);
(5) 调焦方式:通过物镜垂直移动实现调焦,向上7mm向下1.5mm;粗调行程每转≥37.7mm,微调每转≤0.2mm;带粗调松紧度调节环;
(6) 物镜转换器:五孔物镜转换器,后仰式;
(7) 聚光器: ELWD聚光器,数值孔径0.3,工作距离75mm;
(8) 相差滑板:相差滑板(PHL,PH1,中空位);
(9) 可拆卸式移动载物台:控制XY移动,移动范围126 x 78mm;
10) 样品夹:35mm培养皿;
(11) 物镜:
①CFI 荧光相差物镜4X(数值孔径0.13,工作距离16.4mm);
②CFI切趾相差物镜10X(数值孔径0.25,工作距离6.2mm);
③CFI切趾相差物镜20X(数值孔径0.4,工作距离3.1mm);
④CFI切趾相差物镜40X(数值孔径0.55,工作距离2.1mm);
应用:对活体细胞,透明液态组织进行显微观察,也可对培养皿中的培养组织进行动态显微观察